همسانه سازی جایگاه کاتالیتیک اگزوتوکسین a سودوموناس آیروژینوزا

چکیده زمینه و هدف: آنتی بادی بر علیه اگزوتوکسین a سودوموناس آیروژینوزا می تواند در ایمونوتراپی همراه با درمان آنتی بیوتیکی در بیماران دچار سوختگی شدید استفاده گردد. اگزوتوکسین a یکی از فاکتورهای بیماریزای سودوموناس آیروژینوزا است که از سه جایگاه اتصال دهنده، انتقال دهنده و کاتالیتیک تشکیل شده است. هدف از این مطالعه تولید نوترکیب جایگاه کاتالیتیک اگزوتوکسین a این میکرواورگانیسم، جهت تولید آنتی بادی بر علیه آن می باشد. روش بررسی: نمونه های سودوموناس آیروژینوزا از بیماران دچار سوختگی نوع دو و سه بستری در بیمارستان آیت الله موسوی زنجان، جدا و با روش های کشت و انجام آزمایشات بیوشیمیایی شناسایی گردید. dna باکتری استخراج و وجود ژن اگزوتوکسین a روی کروموزوم باکتری از طریق pcr تایید گردید. جایگاه کاتالیتیک اگزوتوکسین a توسط pcr تکثیر و محصول pcr و پلاسمید توسط آنزیم های برش دهنده محدودالاثر، برش داده شدند. محصول pcr و پلاسمید پس از الحاق به باکتری میزبان e. coli bl21(de3) تراریخت گردید. کلون ها با واکنش pcr، هضم آنزیمی و توالی یابی غربالگری و تایید گردیدند. یافته ها: توالی بازهای منطقه ی کاتالیتیک اگزوتوکسین a با اطلاعات بانک ژنی مقایسه و میزان تشابه آن ها ارزیابی گردید. نتایج بیانگر عدم وجود تغییر در ژنوم آن در سوش های مورد مطالعه در کشور بود. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که حدود 90 درصد باکتری های جدا شده دارای سم اگزوتوکسین a بودند. و سوش های جدا شده از ایران با توالی های گزارش شده در بانک ژن مشابه بودند.